鉴定知识

广西亲子鉴定中心常用的PCR促进剂

来源： 柳州中正亲子鉴定中心 日期：2013-09-03 点击： 162 属于： 鉴定知识

1．二甲基亚砜(DMSO)：许多耐热DNA聚合酶厂家推荐在PCR反应中加10% DMSO，这可能是DMSO有变性DNA的作用。DMSO的使用对大肠杆菌DNA聚合酶IKlenow片段
是有益的，但对Taq DNA聚合酶有抑制作用，一般反应中应尽量不用DMSO。在复合PCR中有时选用。
    2．甘油：广西亲子鉴定中心报道，反应中加5%。20%甘油有助于PCR反应的复性过程，尤其对GC含量高和二级结构多的靶序列以及扩增长片段(> 1500bp)更适用。应注意的是，DMSO
和甘油并非对所有PCR均有益，因此，是否加这些试剂应根据具体情况而定，也需要操
作者的摸索。
    3．氯化四甲基铵(TMAC)：在反应中加入l×10-5 -1×10-4mol/L的TMAC可促进PCR，去除非特异扩增，而不抑制Taq DNA聚合酶。
    4.T4噬菌体基因32蛋白质（gp32）：加入0.5 - lvl gp32可使Taq DNA聚合酶对长片段
DNA的扩增改善至少10倍。
    5．石蜡油：反应中所用石蜡油质量要高，不能含抑制Taq DNA聚合酶活性的杂质。加石蜡油目的是防止反应被蒸发后引起反应成分的改变。石蜡油的有无对反应影响较大。
但对于有热盖的PCR仪，如PE-Cetus公司的2400、9600、9700等型基因扩增PCR系统，可以不加石蜡油。

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