柳州亲子鉴定荧光标记自动分析的步骤

柳州亲子鉴定仪器的准备和软件的设置：先开启测序仪和计算机电源，启动合适的基因扫描收集和分析程序，设置电泳参数，如收集方式、梳子大小、电泳时间等。电泳条件一般选为3 000V 2.5h，或l OOOV 4h，根据所用的荧光染料，选择收集方式，确定滤光片种类，PE公司的PROFILER PLUS及COFILER试剂盒使用PLATE CHECK F方式，Promega公司的1.2及I.l试剂盒采用PLATECHECK C模式。    ‘

      关闭其他应用程序，保汪计算机有足够大的内存空间。因为磁盘可用空间越多，系统越安全。如果Macintosh在网站上，应脱离开来，否则易发生“死机”现象，丢失数据。

      柳州亲子鉴定凝胶的安置：用略湿的干净纸巾或滤纸擦去凝胶玻璃板外表面的凝胶、尿素结晶等，尤其是激光扫描口周围的脏物，否则凝胶的扫描基线会很高，干扰数据记录。清洁完玻璃板后，将凝胶玻璃板安装到机器上。点击“PLATE CHECK”进行玻璃板扫描检查，正常条

件下凝胶及玻璃板的扫描基线低又平。如果基线不够平整，应取出凝胶组件，重新清洁表面。当基线平整达到要求时，将1×TBE电极缓冲液加在电泳槽中，用注射器吸取1×TBE液轻轻冲洗凝胶的加样孔，除去凝胶加样孔上面的尿素。预电泳10。15min使温度升至50℃，同时使凝胶中的某些离子电泳出凝胶。

      柳州亲子鉴定按甲酰胺：葡聚糖蓝( Smg/ml)：红色荧光内标=5:1:0.66比例混合成上样缓冲液，取I出上样缓冲液与1FLl扩增样品混合成上样混合物后，95变性2min后移至冰水中骤冷，取irLi用于上样。葡聚蓝为示踪染料，以便加样时能看得清楚。甲酰胺为变性剂，结合加热使双链DNA变性成单链，随后迅速于冰水防止复性，甲酰胺比重为1.13g/ml，有利于上样。为了保证完全变性和混合液合适的比重，建议甲酰胺的终浓度为50%或50%以上。373测序仪最多只能加样4ptl377测序仪最多加1.5Ftl。如果不止一个PCR反应液加在一起，样品体积可能过大，可用真空离心或标准乙醇沉淀减少体积。