柳州亲子鉴定为您简单讲述硅珠DNA提取法

柳州亲子鉴定硅珠DNA提取法原理与固相法类似，在商浓度的硫氰酸的存在下，DNA被二氧化硅特异性地吸附；被吸附的DNA在没有琉氰酸眶存在下．DNA又从二氧化硅中释放出来。硫氰酸是高性能的蛋白变性刺，可以使蛋白质与DNA分离，在硅珠吸附前高速离心可以将变性的蛋白质等不溶纫除去，吸附后的漂冼可将溶液中PCR抑制物除去。因此柳州亲子鉴定提取的DNA比较纯，回收辜高，可以从0.5山的血液中提取到足以进行PCR反应的DNA。
    (1)试剂
  吸附剂：128 GuSCN溶于lOml0．Imol/L Trid - HCI( pH6.4)，0.8ml 0.5mol/L  EDTA，0.5ml Tmon XI00
    瀑洗剂：12g GuSCN溶于lOml O.lmol/L Tris - H]CI  (pH6.4)
    硅珠悬浮液：0.06e Sibc丑溶于Iml无菌超纯水中。
    TES:  Iml Imol/L Tris, (pH8.0),2ml5 mol/L NaCI.2ml O.5mol/L (pH8.0) EDTA,95ml无菌超纯水。
    (2)方法
    将1 - 4r^l血掖加入舍有lOOpl TES和20VI十二烷基肌氯酸钠的0.5rnl离心管中，煮沸5 min．旋涡混合IO.:再加人3∞pI吸附液，旋涡混合5-．再加入20ul硅珠悬浮液，旋涡混合5B．室温放置I0 - 15min．旋涡棍合Ss. 12 000r/min离心30n．去上清泣。沉淀物加入200  1l漂洗液，充分悬浮沉淀物．12 000r/min离心30s，去上清液．重复漂洗一次。沉
淀物用709a乙醇溧洗2 lI：，去乙醇，56aC放置lOmin；加入6q TES，旋涡混合30a，56qC保温JOmin．12 000r/min离心JOmin．取I- 20til上清缓直接进行PCR反应。